Dados do Trabalho

Título

ANALISE DA INDUÇAO DO MIR-10B-5P EM MODELO IN VITRO DO CARCINOMA RENAL DE CELULAS CLARAS LOCALIZADO ASSOCIADO AO ENSAIO DE MIGRAÇAO CELULAR

Introdução e Objetivo

O carcinoma de células renais (CCRs) é o sétimo tipo de câncer mais comum no ocidente, e o terceiro tipo de neoplasia maligna que mais acomete o trato geniturinário, com maior incidência entre 50 e 70 anos, com aproximadamente 7 a 10 casos para cada 100 mil habitantes. Também chamado de hipernefroma adenocarcinoma renal ou tumor de Grawitz, esta doença apresenta diferentes variantes histológicas, sendo a mais recorrente o carcinoma renal de células claras (CRCC). O tipo CRCC é o mais comum de todos os CCRs, representando aproximadamente 75% dos casos. Possui origem no epitélio dos túbulos contorcido proximal (córtex renal). Devido à variedade de padrões histológicos e a particularidade da clínica de cada paciente com CCRs, se torna necessário avaliar diferentes terapias. Visto essa necessidade, novos biomarcadores terapêuticos são estudados. O miR-10b-5p é considerado um supressor de tumor, entretanto no CRCC os estudos demonstram que sua expressão está subexpressa, o que está correlacionado com um pior prognóstico da doença.Portanto, o objetivo deste estudo foi restabelecer a expressão do miR-10b-5p em linhagem celular de carcinoma renal de células claras (786-O) através do uso de seu MIMIC e avaliar seu impacto sobre os ensaios de migração celular.

Método

Transfectamos a linhagem celular 786-O com o MIMIC do 10b-5p e com o agente de transfecção Lipofectamina RNAiMax e, após transfecção realizamos o ensaio de migração celular. Validamos a transfecção com a realização do qPCR e analisamos a expressão do miR-10b-5p.

Resultados

A transfecção do miR-10b-5p foi realizada com sucesso e obtivemos resultados promissores com o ensaio de migração e expressão do miR de estudo, onde o aumento do miR-10b-5p demonstrou influenciar na capacidade de migração celular do carcinoma renal de células claras. Tal miR se mostrou 526x mais expresso em relação ao grupo scramble (p=0,034). E em relação ao grupo controle (p=0,033), a expressão do grupo tratado se mostrou 1372x mais expresso. Tais valores demonstram a eficácia do ensaio.

Conclusão

Acreditamos que, com base nos resultados obtidos de nossos estudos in vitro, o aumento da expressão desse microRNA pode desempenhar um papel na regulação da proliferação e em vias de migração celular.